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史上最全霉菌毒素知識(shí)!——飛測(cè)生物

時(shí)間:2018-01-10來源:點(diǎn)擊量:

       霉菌毒素是霉菌在生長繁殖過程中產(chǎn)生的對(duì)動(dòng)物、人類和農(nóng)作物具有較大毒性的次級(jí)代謝產(chǎn)物。飼料及飼料原料在田間、加工、運(yùn)輸以及儲(chǔ)存的過程中都可能產(chǎn)生霉菌毒素。它們可通過飼料或食品進(jìn)入人和動(dòng)物體內(nèi),引起人和動(dòng)物的急性或慢性毒性。損害機(jī)體的肝臟、腎臟、免疫系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)及生殖系統(tǒng)等。迄今為止,人類所發(fā)現(xiàn)的霉菌毒素就有三百多種。
 
霉菌毒素來源

收獲前霉菌毒素的來源
 
  任何生長中的農(nóng)作物,包括飼草和谷物等,都容易受到霉菌的污染同時(shí)產(chǎn)下霉菌毒素。霉菌在隨農(nóng)作物由田間向飼料加工廠再向飼料槽的轉(zhuǎn)換過程中,可能不會(huì)存活下來,但是霉菌毒素卻完整地保留了下來。

  飼料原料看上去顏色外觀都不錯(cuò),常規(guī)指標(biāo)檢測(cè)分析結(jié)果也不錯(cuò)。但往往就是這些不錯(cuò)的原料很可能早就已經(jīng)成為霉菌毒素的避風(fēng)港了。很多人對(duì)霉菌毒素都存在這樣的認(rèn)識(shí)誤區(qū)。
 
收獲后霉菌毒素的來源
 
  收獲后的農(nóng)作物,如果在貯存、運(yùn)輸、加工、保藏的過程中外環(huán)境滿足霉菌的生長需求,霉菌是會(huì)繼續(xù)生長產(chǎn)毒的。此時(shí)霉菌毒素會(huì)一直積累疊加,最終危害動(dòng)物機(jī)體而不自知。曲霉菌(Aspergillu)和青霉菌(Penicillium)是作物收獲后導(dǎo)致作物霉變危害最大的霉菌。

 

霉菌毒素種類


霉菌毒素是由一些真菌類,特別是曲霉菌、鐮刀霉、青霉菌、鏈格孢菌等真菌產(chǎn)生。這些霉菌毒素由幾百種化學(xué)成分不同的有毒化合物組成。
飼料中其中最常見的霉菌毒素有:
  黃曲霉毒素B1(Aflatoxin:AFB1)
  赭曲霉毒素 A(Ochratoxin:OTA)
  單端孢霉烯:A型(Trichothecene:T-2)、B型(嘔吐毒素Deoxynivalenol:DON)
  玉米烯酮(Zearalenone:ZEN)
  伏馬菌素(Fumonisin: FB)
(Sweeney和 Dobson,1998)。
 
霉菌毒素特性

1、高效性:很低的濃度即能產(chǎn)生明顯的毒性(μg/kg)。在污染比較嚴(yán)重的幾種霉菌毒素當(dāng)中,黃曲霉毒素 B1(AFB1)是具有很強(qiáng)毒性的一種毒素,其毒性是氰化鉀的10倍,砒霜的68倍,被世界衛(wèi)生組織的腫瘤研究機(jī)構(gòu)(IARC)列為Ⅰ類致癌物質(zhì),并且 AFB1 的存在極為普遍,在農(nóng)作物和飼料中廣泛存在。主要損害肝臟功能并有強(qiáng)烈的致癌、致畸、致突變作用,能引起肝癌,還可以誘發(fā)骨癌、腎癌、直腸癌、乳腺癌、卵巢癌等。

2、高穩(wěn)定性:低分子化合物,非常穩(wěn)定,可耐高溫。黃曲霉素具有比較穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì),只有在280℃以上高溫下才能被破壞,它對(duì)熱不敏感,100℃/20小時(shí)也不能將其黃曲霉素完全去除。

3、富集性:抗化學(xué)生物制劑及物理的滅能作用,可以在生物鏈中不斷傳播、富集。原本被分泌及污染而殘留在土壤中的霉菌毒素會(huì)被后來種植的谷物所吸收,從而引起更多霉菌毒素污染及感染的問題。

4、特異性:分子結(jié)構(gòu)不同毒性相差很大。如黃曲霉毒素族有黃曲霉毒素B1,B2,M1,M2,毒性均不一樣。

5、協(xié)同性:由于農(nóng)作物可能被幾種真菌共同污染,因此,飼料中可能同時(shí)存在幾種霉菌毒素。

6、相加性:當(dāng)兩種以上的霉菌毒素混合在一起造成的傷害,會(huì)比個(gè)別霉菌毒素單獨(dú)造成的傷害總和還要大。
 

▲表1霉菌毒素間的相互作用 


7、污染地域性:動(dòng)物飼料及農(nóng)產(chǎn)品中霉菌毒素的產(chǎn)生具有一定的地域性。例如,熱帶和亞熱帶區(qū)域是曲霉菌生長的最佳環(huán)境。盡管如此,飼料和農(nóng)產(chǎn)品貿(mào)易的全球化導(dǎo)致霉菌毒素在全世界范圍內(nèi)傳播。
 
8、隱蔽性:霉菌毒素檢測(cè)時(shí)也常受到小分子物質(zhì)(糖苷,葡糖苷酸,脂肪酸酯和蛋白質(zhì))的掩蓋,這些小分子物質(zhì)與霉菌毒素結(jié)合在一起,導(dǎo)致檢測(cè)值為錯(cuò)誤的陰性結(jié)果。最終,這些被掩蓋的霉菌毒素不能被傳統(tǒng)的分析方法所檢測(cè)。但這些結(jié)合到霉菌毒素上的分子可能在消化過程中被解除,從而釋放出霉菌毒素,危害動(dòng)物健康。
 
作用機(jī)理

       黃曲霉毒素 B1能抑制 DNA 的合成、抑制RNA酶的活性、信使RNA以及蛋白質(zhì)的合成。還可以導(dǎo)致染色體異常,微核的產(chǎn)生、姐妹染色單體的交換、DNA的無序合成、染色體鏈的斷裂,以及在人類和嚙齒類細(xì)胞中形成加合物( Giuseppina 等,2003)。
 
      赭曲霉毒素 A是抑制蛋白質(zhì)合成的關(guān)鍵酶,其可降低蛋白質(zhì)的合成效率,進(jìn)而影響DNA和 RNA的合成(王曉峰,2003)。
 
在體外玉米烯酮能引起姐妹染色單體的交換、染色體的斷裂以及中國倉鼠卵母細(xì)胞的多倍性。在小鼠和大鼠上也觀察到玉米烯酮誘導(dǎo) DNA加合的現(xiàn)象。
 
  單端孢霉烯是已知蛋白質(zhì)合成的抑制劑,該毒素結(jié)合于肽基轉(zhuǎn)移酶,此酶是60S核糖體亞基的一個(gè)重要組成部分(Feinberg 和McLaughlin,1989)。此外,單端孢霉烯還能抑制 DNA和 RNA 的合成(WHO,1990)。
 

霉菌毒素危害

1.黃曲霉毒素

特征:
1.主要由黃曲霉菌和寄生曲霉菌產(chǎn)生。
2.由約20種結(jié)構(gòu)相似的化學(xué)物質(zhì)組成,其中以B1、B2、G1、G2及M1最為重要。
3.國家法規(guī)規(guī)定飼料中這種毒素的含量不得超過20ppb.
4.敏感性:豬>牛>鴨>鵝>雞
危害:


2.玉米赤霉烯酮

特征:1.主要由粉紅色鐮刀菌產(chǎn)生。
2.主要來源是玉米,熱處理不能破壞此毒素。
3.敏感性:豬>>牛、畜類>禽類
危害:
玉米赤霉烯酮是一種具有雌激素類物質(zhì)活性的毒素,主要危害種用畜禽,其中青年母豬對(duì)之最為敏感。
◆1~5ppm:后備母豬陰部紅腫,假發(fā)情。
◆>3ppm: 母豬和后備母豬不發(fā)情。
◆10ppm: 保育及育肥豬增重減緩,仔豬脫肛,八字腿。
◆25ppm: 母豬偶發(fā)性不孕。
◆25~50ppm:窩數(shù)少,新生仔豬體型小;新生小母豬陰部紅腫。
◆50~100pm:假懷孕,乳腺變大,乳汁滲出,出現(xiàn)臨產(chǎn)前的征兆。
◆100ppm:持續(xù)性不孕,乘架其它母豬,卵巢萎縮變小。

3.T-2 毒

特征:1.主要由三線鐮刀真菌產(chǎn)生。
2.主要來源是玉米、小麥、大麥、燕麥。
3.對(duì)豬、乳牛、家禽和人都有危害。
4.敏感性:豬>牛畜類>禽類
危害:1.為毒性高的免疫抑制物質(zhì),破壞淋巴系統(tǒng)。
2.危害生殖系統(tǒng),可引起種豬不孕、流產(chǎn)或產(chǎn)下虛弱仔豬。
3.采食量降低、嘔吐、下血痢甚至死亡。
4.目前被認(rèn)為是對(duì)家禽最毒的毒素,可引起口腔和腸道出血、潰瘍,降低免疫力,產(chǎn)蛋量下降,體重減輕。
5.允許極限:
★反芻動(dòng)物和蛋禽:5ppm
★肉禽和豬:2ppm
★人、小豬和馬:1ppm

4.赭曲毒素

特征:1.主要由曲霉菌產(chǎn)生。
2.主要來源是玉米。
危害:1.造成動(dòng)物免疫系統(tǒng)功能抑制。
2.造成哺乳動(dòng)物的肝臟及腎臟受損,尤其對(duì)豬和人危害更大。
3.造成母豬流產(chǎn)和產(chǎn)仔重偏輕。
4.高毒性,可致癌。
5.允許極限:
畜禽:50ppb
人:20ppb

5.嘔吐毒素

特征:1.最常見的鐮刀霉毒素,高溫處理完全無法破壞它。
2.主要來源是玉米、小麥、大麥、燕麥。
3.敏感性豬>>牛畜類>禽類
危害:對(duì)豬只影響較大,主要癥狀為豬只厭食,嚴(yán)重者表現(xiàn)為拒食或嘔吐。
★1~2ppm:攝食量減少,增重減緩。
★5ppm:攝食量減少30~50%。
★10ppm:由于拒食導(dǎo)致飼料消耗量和增重急劇減少。
★12ppm:完全拒食。
★20ppm:導(dǎo)致嘔吐。
此外,還會(huì)造成皮下及肌肉出血,降低繁殖率及抑制各種動(dòng)物的免疫力。
允許極限:
★反芻動(dòng)物和蛋禽:5ppm
★肉禽和豬:2ppm
★人、小豬和馬:1ppm

6.串珠鐮孢菌毒素

特征:

1.1988年由南非學(xué)者發(fā)現(xiàn)。

2.主要由串珠鐮孢菌產(chǎn)生。
3.主要來源是玉米、高梁。
危害:1.對(duì)多數(shù)動(dòng)物:降低免疫功能,損害肝臟和腎臟,降低增重,增加死亡率。
2.對(duì)豬的危害:不孕、肺水腫、呼吸困難、死亡。
3.對(duì)家禽的危害:降低食欲,免疫力下降。
4.對(duì)馬的危害:貧血、腦壞死。
5.允許極限:
★反芻動(dòng)物:50ppm
★豬:10ppm
★馬:2ppm
★人:1ppm[3]
 
對(duì)飼料營養(yǎng)價(jià)值及消化利用率的影響
 
霉菌能使飼料脂肪迅速變質(zhì),蛋白質(zhì)消化率降低,嚴(yán)重降低飼料中賴氨酸和精氨酸水平,使飼料代謝能減少(遲俊和于安琳,1998)。
 
對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能的影響

高水平(3.5 mg/kg 飼料)的黃曲霉毒素的混合物,能降低肉仔雞體增重,增加肝臟和腎臟的重量(Smith 等,1992)。黃曲霉毒素同時(shí)也使血液尿素氮的水平升高,血清總蛋白、白蛋白、甘油三脂和血清磷水平降低。
 
單胃動(dòng)物特別是豬對(duì)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇更為敏感。Danicke(2002)報(bào)道,對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)性能起抑制作用的日糧脫氧雪腐鐮刀菌烯醇臨界濃度,豬為 1 mg/kg飼料。
 
Southern 和 Clawson 等(1979)給育成豬飼喂含有不同水平(0.02、0.385、0.75、 1.48 mg/kg飼料)的黃曲霉毒素的飼糧,當(dāng)黃曲霉毒素濃度在0.385 mg/kg以上時(shí),平均日增重隨濃度的升高呈線性降低。
 
Huff等(1988)發(fā)現(xiàn)給豬飼喂含有黃曲霉毒素(2 mg/kg飼料)、赭曲霉毒素A(2 mg/kg飼料)或者同時(shí)含有這2種毒素的飼料,體增重分別降低 26 %、24 %和52 %。豬采食霉菌毒素污染的飼糧,其血清白蛋白、總蛋白和血清尿素氮的水平降低,這表明豬生長速度的降低可能是由于蛋白質(zhì)合成降低所致( Lindemann 等,1993)。
 
斷奶仔豬飼喂被多種鐮刀霉菌毒素污染的飼糧,在21d的試驗(yàn)期中,生長速度和采食量分別比對(duì)照組降低 34.6 %和 32.6 %( Swamy 等,2002)
 
對(duì)動(dòng)物繁殖性能的影響
 
粉紅色鐮孢菌主要產(chǎn)生2種類型的霉菌毒素,非雌激素活性的單端孢霉烯(如去氧雪腐鐮刀菌烯醇)和雌激素樣活性的玉米烯酮及其代謝物玉米赤霉烯醇。玉米烯酮及其代謝物 α - 玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇具有和β -雌二醇相似的作用,可干擾動(dòng)物繁殖過程( Diekman 和Green,1992)。
 
玉米烯酮會(huì)引起成年的繁殖母豬多方面的繁殖功能紊亂(Rainey等,1990)。Chang等(1979)報(bào)道,從斷奶到下一個(gè)妊娠期開始連續(xù)飼喂含有25 ~100 mg/ kg玉米烯酮的飼糧能夠引起持續(xù)發(fā)情,假妊娠,甚至不育。
 
對(duì)動(dòng)物免疫機(jī)能的影響

霉菌毒素導(dǎo)致免疫抑制可表現(xiàn)為降低 T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的活性,抑制免疫球蛋白和抗體的產(chǎn)生,降低補(bǔ)體和干擾素的活性,損害了巨噬細(xì)胞的功能(Corrier,1991)。
 
對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)的影響

  霉菌毒素在動(dòng)物產(chǎn)品中會(huì)有一定的殘留。黃曲霉毒素和赭曲霉毒素A由于代謝較慢,在肉中的檢出率較高,而單端孢霉烯很快代謝,基本沒有殘留,只有在很高的濃度時(shí)才會(huì)在肉和奶中出現(xiàn)殘留(Fink,1989)。試驗(yàn)中已觀察到赭曲霉毒素 A由飼料向肉中轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象(Madsen 等,1982)。


一、 上海飛測(cè)生物霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)箱

上海飛測(cè)生物基于領(lǐng)先的熒光定量FPOCT技術(shù)平臺(tái),推出了霉菌毒素移動(dòng)檢測(cè)平臺(tái)--霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)箱,結(jié)合了膠體金快速、酶聯(lián)免疫定量以及色譜法準(zhǔn)確的特點(diǎn),可在8min內(nèi)快速準(zhǔn)確定量的測(cè)定出糧油谷物飼料中的霉菌毒素,包括黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬菌素、T2毒素等含量,樣品前處理簡單(僅需7min),六種毒素一次提取即可,操作簡便,只需一步加樣,無需標(biāo)準(zhǔn)品,無需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果準(zhǔn)確可靠且可現(xiàn)場(chǎng)打印,準(zhǔn)確性高度符合HPLC法的檢測(cè)結(jié)果,為霉菌毒素的快速現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)提供了一種全新的技術(shù)手段,適用于各類原料收儲(chǔ)、糧油加工企業(yè)、飼料加工企業(yè)、養(yǎng)殖企業(yè)及政府相關(guān)監(jiān)管部門。

               霉菌毒素快速檢測(cè)箱

二、 霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)箱的組成


霉菌毒素快速檢測(cè)箱組成


霉菌毒素快速檢測(cè)箱儀器設(shè)備


三、霉菌毒素檢測(cè)項(xiàng)目及性能參數(shù)

霉菌毒素快速檢測(cè)箱檢測(cè)項(xiàng)目


四、檢測(cè)樣本適用范圍

霉菌毒素檢測(cè)箱應(yīng)用領(lǐng)域


      五、檢測(cè)過程

      5.1 樣品前處理過程

      1、 粉碎;
      2、 振蕩提?。?min);
      3、 離心(2min);

霉菌毒素快速檢測(cè)前處理
     5.2 檢測(cè)過程

      1、 稀釋;
      2、 加樣反應(yīng)(8min);
      3、 讀數(shù),打印檢測(cè)報(bào)告;

霉菌毒素快速檢測(cè)過程

  5.3 結(jié)果判斷和輸出

      采用便攜式霉菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀進(jìn)行讀數(shù),檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確、客觀。
      檢測(cè)結(jié)果將呈現(xiàn)于熒光讀數(shù)儀液晶顯示屏上,同時(shí)可按打印鍵打印獲得紙質(zhì)的檢測(cè)報(bào)告,另外,開通儀器的WIFI數(shù)據(jù)上傳功能后,檢測(cè)相關(guān)數(shù)據(jù)信息將自動(dòng)上傳至“食品安全溯源管理云平臺(tái)”,便于溯源及質(zhì)量管理。

霉菌毒素檢測(cè)儀    霉菌毒素檢測(cè)結(jié)果


   六、上海飛測(cè)熒光定量FPOCT技術(shù)平臺(tái)與其他方法學(xué)技術(shù)性能的對(duì)比

霉菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)比較


   七、上海飛測(cè)生物霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)系統(tǒng)優(yōu)點(diǎn)

    ? 8min快速準(zhǔn)確定量檢測(cè):集膠體金快速檢測(cè)、酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)、色譜質(zhì)譜準(zhǔn)確檢測(cè)的特點(diǎn)于一身,可在8min內(nèi)實(shí)現(xiàn)多種霉菌毒素的快速準(zhǔn)確定量測(cè)定;
    ? 內(nèi)置定量標(biāo)準(zhǔn)曲線:儀器內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線,無需使用標(biāo)準(zhǔn)品,無需檢測(cè)時(shí)再做標(biāo)準(zhǔn)曲線,既節(jié)省了成本,也避免了操作人員與霉菌毒素的接觸,保護(hù)操作人員的安全;
    ? 多合一的樣品前處理過程:前處理方法統(tǒng)一,一種提取液一次提取即可檢測(cè)所有種類的霉菌毒素,無需對(duì)提取液進(jìn)行任何pH的調(diào)節(jié),大大提升檢測(cè)的便捷性和效率;
    ? 隨到隨檢:無需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)檢測(cè)樣本量無要求,既可單個(gè)或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時(shí)檢測(cè),檢測(cè)成本無區(qū)別;既可用于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)質(zhì)控檢測(cè),也可用于收糧現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè),確保原料收購的質(zhì)量;
    ? 操作簡便:對(duì)配套的儀器設(shè)備和檢測(cè)人員要求低,操作人員僅需短期培訓(xùn)就能熟練掌握;
    ? 行標(biāo)支持,國糧局權(quán)威驗(yàn)證:基于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)LST6111-2015、LST6112-2015和LST6113-2015,并通過國糧局及農(nóng)科院的權(quán)威驗(yàn)證;
    ? 樣本適用范圍廣:采用時(shí)間分辨熒光專利技術(shù),抗基質(zhì)干擾強(qiáng),樣本適用性廣,既可檢測(cè)小麥、玉米、大米等原糧,也可檢測(cè)各種粕類、麩皮、DDGS等飼料原料,還可檢測(cè)花生油、玉米油等各種植物油;
    ? 數(shù)據(jù)上傳及溯源管理:熒光定量分析儀具備數(shù)據(jù)無線上傳的功能,可根據(jù)客戶的需求定制開發(fā)相應(yīng)的數(shù)據(jù)管理和溯源管理系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)公司總部對(duì)各分公司、上級(jí)監(jiān)管部門對(duì)下級(jí)監(jiān)管部門或者監(jiān)管部門對(duì)各監(jiān)管對(duì)象檢測(cè)數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)掌握和分析;
    ? 經(jīng)濟(jì)實(shí)惠:花膠體金試紙條的價(jià)格,獲得色譜檢測(cè)的質(zhì)量和結(jié)果,并且節(jié)省人力物力,大幅降低檢測(cè)費(fèi)用;
霉菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)優(yōu)點(diǎn)


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