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食品中赭曲霉毒素A的快速檢測(cè)方法

時(shí)間:2019-03-14來(lái)源:上海飛測(cè)點(diǎn)擊量:

    赭曲霉毒素是生長(zhǎng)在食物及飼料中的赭曲霉和疣孢青霉產(chǎn)生的一系列化學(xué)結(jié)構(gòu)類似物。關(guān)于赭曲霉毒素A毒性已經(jīng)進(jìn)行了大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),毒理學(xué)研究表明,赭曲霉毒素A具有很強(qiáng)的肝臟毒性和腎臟毒性,并有致畸,致突變和致癌作用。赭曲霉毒素A被公認(rèn)為是目前致癌力最強(qiáng)的天然物質(zhì)之一,并且分布范圍廣,對(duì)世界范圍內(nèi)的絕大多數(shù)食品原料和制成品均有不同程度的危害。在世界某些地區(qū),赭曲霉毒素A被懷疑與豬真菌毒素腎病有關(guān),并在流行區(qū)人血液中檢出該毒素。膳食攝入赭曲霉毒素A與人類健康的關(guān)系越來(lái)越引起人們的重視和關(guān)注。

    由于赭曲霉毒素A產(chǎn)生菌廣泛分布于自然界,因此包括糧谷類,干果,葡萄及葡萄酒,咖啡,可可和巧克力,中草藥,調(diào)味料,罐頭食品,油,橄欖,豆制品,啤酒,茶葉等多種農(nóng)作物和食品均可被赭曲霉毒素A污染。動(dòng)物飼料中赭曲霉毒素A的污染也非常嚴(yán)重。在以糧食為動(dòng)物飼料主要成分的國(guó)家如歐洲,動(dòng)物進(jìn)食被赭曲霉毒素A污染的飼料后導(dǎo)致體內(nèi)赭曲霉毒素A的蓄積,由于赭曲霉毒素A在動(dòng)物體內(nèi)非常穩(wěn)定,不易被代謝降解,因此動(dòng)物性食品,尤其是豬的腎臟,肝臟,肌肉,血液,奶和奶制品等中常有赭曲霉毒素A檢出。人通過(guò)進(jìn)食被赭曲霉毒素A污染的農(nóng)作物和動(dòng)物組織接觸赭曲霉毒素A,受到赭曲霉毒素A的危害,世界范圍內(nèi)對(duì)赭曲霉毒素A污染基質(zhì)調(diào)查研究最多的是谷物(小麥,大麥,玉米,大米等),咖啡,葡萄酒和啤酒,調(diào)味料等。

    案例分析:克羅地亞1996和1997年分別對(duì)當(dāng)?shù)禺a(chǎn)105份玉米中赭曲霉毒素A的污染水平進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果表明,赭曲霉毒素A的平均含量分別為3.61μg/kg和19.8μg/kg,最高污染水平分別為224μg/kg/和614μg/kg;



    歐洲國(guó)家1995年-1999年對(duì)咖啡中赭曲霉毒素A的污染情況進(jìn)行了全面調(diào)查,其中30份德國(guó)市售烤咖啡豆,20份檢出赭曲霉毒素A,濃度從0.3μg/kg-7.5μg/kg不等;80份英國(guó)速溶咖啡中有64份檢出赭曲霉毒素A(0.1-8μg/kg),陽(yáng)性率達(dá)到80%。



    在豬霉菌毒素腎病流行的丹麥,對(duì)300份豬腎臟的分析結(jié)果顯示,237份呈赭曲霉毒素A陽(yáng)性,陽(yáng)性率為79%,最高達(dá)14.72μg/kg。德國(guó)也檢測(cè)了61份豬腎臟,其中27份呈陽(yáng)性,陽(yáng)性率為44.26%,最高含量為9.33μg/kg。



    澳大利亞,法國(guó),西班牙等許多國(guó)家報(bào)道了葡萄酒中赭曲霉毒素A的存在。葡萄酒中赭曲霉毒素A的含量一般在0.01-3.4μg/kg,甜酒中赭曲霉毒素A對(duì)的含量在1-3.9μg/kg,葡萄汁中赭曲霉毒素含量在1.16-2.32μg/kg,而葡萄干中赭曲霉毒素A的含量相對(duì)更高,一般超過(guò)40μg/kg。



赭曲霉毒素A的現(xiàn)有檢測(cè)方法比較:

    由于赭曲霉毒素A在糧食中的含量很低,所以檢測(cè)手段要求很高。世界各國(guó)有關(guān)學(xué)者對(duì)赭曲霉毒素A進(jìn)行了許多了研究, 目前的檢測(cè)方法主要分為兩大類:即確認(rèn)方法和快速方法。確認(rèn)方法主要基于理化儀器設(shè)備,如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術(shù)如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學(xué)基礎(chǔ)上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(cè)(IAC-FLD)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析法等。

    TLC是赭曲霉毒素A早期研究中最常見(jiàn)的檢測(cè)方法,因其操作簡(jiǎn)便曾被廣泛應(yīng)用,但這種方法較費(fèi)時(shí)(48小時(shí)左右),靈敏度和特異性較差,在赭曲霉毒素A的提取過(guò)程中所需的有機(jī)溶劑品種多且量大。

    HPLC法具有較高的靈敏度,可以精確地對(duì)樣品中的赭曲霉毒素A進(jìn)行定性和定量分析,但此法不適合不批量樣品的檢測(cè)。

    酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測(cè)卡是企業(yè)常用的快速檢測(cè)方法,但也均存在各自的優(yōu)缺點(diǎn):ELISA 方法能靈敏度相對(duì)較高,且能定量檢測(cè),但操作過(guò)程相對(duì)復(fù)雜,對(duì)環(huán)境和人員要求高,環(huán)境干擾因素復(fù)雜,重復(fù)性較差;膠體金檢測(cè)卡可以滿足現(xiàn)場(chǎng)快速的要求,能在5-10min內(nèi)快速測(cè)定,但是只能定性,且靈敏度較低,肉眼觀察主觀性較強(qiáng),重復(fù)性差。

    上海飛測(cè)生物基于領(lǐng)先的熒光定量FPOCT技術(shù)平臺(tái),開(kāi)發(fā)了真菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)系統(tǒng),包含霉菌毒素快速檢測(cè)儀和霉菌毒素系列熒光定量快速檢測(cè)試紙條,該系統(tǒng)結(jié)合了膠體金快速、酶聯(lián)免疫定量以及色譜法準(zhǔn)確的特點(diǎn),可在8min內(nèi)快速準(zhǔn)確定量的測(cè)定出食品中赭曲霉毒素的含量。樣品前處理簡(jiǎn)單(僅需7min),操作簡(jiǎn)便,只需一步加樣,無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)品,無(wú)需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,采用熒光免疫定量分析儀讀數(shù),結(jié)果準(zhǔn)確可靠且可現(xiàn)場(chǎng)打印,準(zhǔn)確性高度符合HPLC法的檢測(cè)結(jié)果,為霉菌毒素的快速檢測(cè)和控制提供了一種全新的技術(shù)手段,適用于各類飼料加工企業(yè)、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)及政府相關(guān)監(jiān)管部門(mén)。




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